Conservation morphologique optimale durant 64 heures maximum Tous les échantillons de tissus. Tous les types de tissus ont été conservés sous vide (colon, vésicule biliaire, rate, rein, thyroïde, sein etc...) pour jusqu’à 48 à 64 heures avec une préservation histologique optimale5. Excellentes propriétés de coloration H&E, HC, IHC, FISH. Plus d’un millier de cas, traités par préservation sous vide, ont été suivis à l’Hôpital Universitaire Molinette à Turin, Italie. La préservation Morphologique et la réactivité immuno-histochimique étaient excellentes et aucun effet indésirable n’a été observé. H&E Adénocarcinome du colon. L’échantillon a été conservé sous vide à 4°C durant 48h, puis traités en routine avec une fixation au formol et une imprégnation en paraffine. La structure est préservée et le diagnostic est fiable. H&E x 150 IHC Carcinome canalaire infiltrant du sein. L’échantillon de tissus prélevé le vendredi après midi a été conservé sous vide à 4°C jusqu’au lundi matin (64h) puis, après la macroscopie, fixé et traité. La structure histologique est bien conservée. La coloration pour la recherche d’antigène HER2 (Herceptest TM de DAKO) montre une membrane continue, coloration dans >30% des cellules (3+). FISH Carcinome canalaire infiltrant du sein. Échantillon de tissus conservé (au bloc) pour 64h sous vide, à 4°C. La coloration double FISH démontre l’amplification du gène HER 2 (signal rouge). Études Moléculaires . Banques biologiques. La qualité de préservation du RNA est, bien évidemment, associée au temps de traitement, mais même les tissus conservés sous vide à 4°C durant 48 heures ont fourni des acides nucléiques de bonne qualité3. Cette donnée est en accord avec les rapports sur la stabilité du RNA dans des échantillons non fixés conservés sur de la glace4. La muqueuse du colon, soit congelée immédiatement après son obtention (A) soit préservée sous vide à 4°C durant 48h (B) (a) montre 1% de dénaturation d’un gel d’agarose d’un brin complet d’ARN : la bande 18s est visible et aucune dégradation n’est à constater. (b) représente les produits de RT-PCR issus d’une cytokératine 20mRNA de différentes paires de base. La bande supérieure (flèche) est associée à un produit de 716 paires de base. Micke P, Ohshima M, Tahmasebpoor S, Ren ZP, Ostman A, Ponten F, Botling J (2006) Biobanking of fresh frozen tissue: RNA is stable in non-fixed surgical specimens. Lab Invest 86:202-211. 5 Evaluation of tissue preservation using a vacuum-based refrigeration system for specimen transfer from theatre to laboratory D Boyle, R Carson, P Kelly, M Catherwood, S Carroll, L Venkatraman, S McQuaid, H McBride, J James, MB Loughrey, Department of Pathology, Royal Group of Hospitals Trust, Belfast, Northern Ireland. Images courtesy of Prof. G. Bussolati Turin University (Italy). 4

Des avantages pour tous Personnel du laboratoire d’Histopathologie • Durée de la fixation intégralement contrôlée par le laboratoire. • Pas de vapeurs toxiques. Pas de manipulations de bidons lourds. • Les couleurs des échantillons biologiques sont conservées intactes. Conditions assimilables à celles d’un prélèvement « frais ». • Optimisation des protocoles de démasquage antigénique basée sur les données de fixation contrôlées par le laboratoire. • Possibilité de banque de tissus. • Traitement par des fixateurs moléculaires. • Conservation des échantillons après la macroscopie. Personnel des...

Standardisation et documentation de l’étape pré-analytique Sans formol Système de transfert sous vide poussé d’échantillons biologiques

TissueSAFE : Système de transfert sous vide poussé d’échantillons Élimination du Formol des blocs opératoires aux laboratoires d’Anatomie Pathologie. L’agence Internationale de Recherche contre le Cancer (IARC1) a classifié le formol comme carcinogène de classe 1. Cette nouvelle classification encourage les autorités de Santé publique, les équipes chirurgicales, les pathologistes et les techniciens en Histologie à éliminer cette substance de l’environnement du travail. Un moment d’exposition critique, pour le personnel concerné, se situe lors du transfert des tissus des blocs opératoires vers...

Comment contrôler la fixation. Point de départ dans le laboratoire : des tissus « frais »! TissueSAFE ou une technologie innovante pour le transfert sous vide poussé, et hermétique, des échantillons au laboratoire d’Anatomie Pathologie. Études Moléculaire? Les blocs sélectionnés sont insérés dans des cassettes pour une fixation au formol dans des conditions contrôlées (eg.FixMATE). Des protocoles de fixation au choix Les échantillons peuvent être fixé par un fixateur moléculaire à base d’éthanol (eg. FineFIX). Les blocs sélectionnés peuvent être congelés pour les conserver dans une banque. 6...